上海交通大学分析测试中心冷冻超薄切片机

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仪器名称        冷冻超薄切片机        
英文名称        Cryo-ultramicrotome
规格/型号        */*UC6-FC6
生产厂商       
国别        德国
所属单位        分析测试中心>>314        放置地点        313(314)
负责人        郭新秋 邮箱：guoxq@sjtu.edu.cn
王戈 邮箱：0
朱燕华 联系电话：34206175-103 邮箱：zhuyanhua@sjtu.edu.cn
收费标准        基础费率：
碳支持膜：
普通碳支持膜【校内:20元 校外:40元】／2个铜网/样品
非普通碳支持膜（微栅、超薄碳膜）【校内:40元 校外:80元】／2个铜网/样品
样品前处理：
普通样品包埋【校内:50元 校外:100元】／样品
生物样品前处理【校内:100元 校外:200元】／样品
测试项目：
自主操作【校内:200元 校外:】／小时
超薄切片：
常温切片（普通样品）【校内:100元 校外:1000元】／样品
常温切片（细胞吞噬样品、含金属氧化物等样品）【校内:350元 校外:1000元】／样品
冷冻切片【校内:800元 校外:2000元】／样品
常温样品定位【校内:300元 校外:600元】／小时
生物样品切片染色【校内:50元 校外:100元】／样品
性能指标        切片范围70nm-15000 nm 切片速度控制范围：0.05-100 mm/sec
主要应用        各种细胞、组织、细菌等生物样品的前处理 各种有机物的超薄切片
样品要求        植物样品： 1.自来水冲洗表面泥尘后，使用灭菌水清洗2-3次，置于含有固定液液滴 的载玻片上。 2.使用干净锋利的刀片切取目标材料，所取材料体积不大于2 mm3。 切取样品时应注意动作迅速、减小损伤，避免来回切拉；使用的灭菌水及器 具应4℃预冷，并在操作中尽量保持低温以降低组织细胞活性。 3.将切下材料放入装有预冷的戊二醛固定液的小瓶中后抽气，抽几次后轻 摇小瓶。重复2-3次，直到样品沉入瓶底。 4.固定6小时以上可送电镜室。 动物样品： 1. 4℃预冷生理盐水冲洗组织块，立即放入载玻片上的固定液小滴中，然后用新的干净双面刀片在固定液中把组织切成小块，体积不大于2 mm3。　　 2. 组织块被剪刀剪切或镊子夹过的部分弃去，然后用牙签将组织小块轻轻挑起，放入装有固定液的小管中浸泡固定。也可用镊子借液体的张力移取组织块，注意不可用力夹。小管置于4℃冰箱中保存。每份样本的组织小块需≥5块。将切取的组织块投入装有预冷戊二醛固定液的小瓶中，并抽气直至样品沉底。 3. 固定4-6小时以上可送电镜室。 肝脏：切除被膜，切成立方体小块。 肾脏：分为皮质与髓质。根据实验的要求取相应部位，切除包膜，切成立方体小块。 肺脏：同肝脏取材，但因肺中有大量的肺泡及细支气管，所以在固定时小块会漂浮在 固定液液面上，需用空针抽真空，使小块完全浸没在固定液中。 肠、血管：此类管腔型组织，在固定时要将其剖开，使内膜面得以充分的固定，如不剖开而直接浸在固定液中，由于固定液渗透时间的影响，进入内膜面需要一定时间， 这样内膜面的超微结构已经改变。管腔型组织需切成长方体小块。 神经：此类组织也存在横切和纵切的差别，所以也要切成长方体小块。 心脏：如果可辨清肌纤维方向，则按照肌肉取材。否则同肝脏取材。 细胞样品： 细胞离心收集完毕后（使用1.5ml尖头离心管），需弃去培养基，用磷酸缓冲液冲洗一到两遍后再次离心弃缓冲液，然后加入预冷的固定液，并用吸管轻轻吹打，使细胞悬浮于固定液中，置于4℃箱固定4-6小时后送样。由于电镜样本制备过程中会不可避免地损失掉一部分细胞，因此细胞必须达到一定数量，即为离心后细胞量至少为绿豆样大小。
仪器说明        Leica UC6冷冻超薄切片机，适于用比较软的物质（例如：高分子、生物材料、橡胶、塑料等）的超薄切片(约100 nm)和半薄切片（1-15μm），以便样品进行后续的观察。如光学显微镜、透射电镜、原子力显微镜、显微红外光谱仪等。该超薄切片机具有低温液氮冷冻系统，可提供0至-185℃的低温切片环境。